Apa yang dimaksud dengan deteksi asam nukleat PCR, metode dan langkah-langkahnya
Pengujian asam nukleat saat ini merupakan cara yang efektif untuk menentukan apakah virus tersebut membawa virus corona baru. Saat ini, orang terutama menggunakan usap hidung, usap tenggorokan dan serum antibodi lgm untuk referensi. Tetapi menurut persyaratan masuk terbaru Singapura, pengujian asam nukleat PCR dilakukan, jadi apa yang dimaksud dengan pengujian asam nukleat PCR?
Apa arti dari deteksi asam nukleat PCR
PCR berarti reaksi berantai polimerase, yang dapat digunakan untuk mengamplifikasi DNA, sehingga dapat mengamplifikasi sejumlah kecil DNA sejauh dapat dideteksi. Asam nukleat dari beberapa virus adalah DNA, dan metode ini perlu digunakan untuk deteksi. Oleh karena itu, PCR bukanlah pemeriksaan yang dilakukan, melainkan metode pendeteksian DNA. Misalnya, kuantifikasi DNA virus hepatitis B menggunakan metode ini. Tujuan pemeriksaan DNA adalah untuk mendiagnosis penyakit di satu sisi. Jika bahkan DNA patogen dapat dideteksi, itu berarti patogen tersebut terinfeksi; di sisi lain, ini untuk menilai seberapa banyak virus telah bereplikasi, untuk menilai tingkat keparahan penyakit atau efek pengobatan.
Metode dan langkah deteksi asam nukleat PCR
Pengujian asam nukleat memerlukan lima langkah: pengambilan sampel, retensi sampel, retensi, ekstraksi asam nukleat, dan pengujian komputer.
Langkah pertama dalam deteksi asam nukleat adalah mengumpulkan sekresi manusia, dan menyeka rongga hidung atau dinding belakang faring dan amandel faring bilateral dengan tes hidung atau tes faring.
Pada langkah kedua, staf medis menyimpan sampel, mencelupkan kepala benda uji ke dalam larutan pengawet sel, dan memasang tutup tabung segera setelah ekornya putus.
Di bagian ketiga, masukkan sampel ke dalam kantong kedap udara, simpan dan kirimkan untuk diperiksa tepat waktu.
Langkah keempat adalah mengirim sampel ke laboratorium untuk mengekstrak asam nukleat.
Pada langkah kelima, ekstrak mengalami reaksi amplifikasi PCR fluoresen.
Apa itu asam nukleat?
Asam nukleat (nucleic acid) adalah jenis makromolekul biologis yang terdiri dari nukleotida (nukleotida), dibagi menjadi asam ribonukleat (RNA) dan asam deoksiribonukleat (DNA), di mana RNA sebagian besar struktur Rantai tunggal, DNA sebagian besar struktur beruntai ganda. Selain prion, asam nukleat adalah makromolekul biologis yang diperlukan untuk kehidupan. Fungsi utamanya adalah untuk membentuk pembawa informasi genetik kehidupan. Selain itu, beberapa asam nukleat dapat digunakan sebagai dan berpartisipasi dalam pembentukan enzim yang aktif secara biologis. Molekul atau mesin molekuler lainnya.
Apa itu pengujian asam nukleat?
Deteksi asam nukleat, seperti namanya, adalah untuk mendeteksi asam nukleat.
Apa keuntungan unik dari pengujian asam nukleat? Mengapa bisa digunakan sebagai"gold standard" untuk diagnosis virus corona baru?
Faktanya, setiap metode deteksi memiliki skenario aplikasinya sendiri. Mengambil deteksi virus sebagai contoh, objek deteksi dari metode deteksi imunologi biasa (koloid emas, ELISA, chemiluminescence, dll.) adalah antigen atau antibodi virus, yang setara dengan"gambar samping&kutipan;. Karena ada jendela waktu dari infeksi hingga deteksi, metode deteksi imunologi umumnya tidak cocok untuk diagnosis dini.
Apa yang dimaksud dengan deteksi asam nukleat PCR, metode dan langkah-langkahnya
Positif palsu dan negatif palsu
1. Positif palsu
Biasanya hasil positif palsu lebih sedikit. Umumnya, pengoperasian personel laboratorium yang tidak tepat dapat menyebabkan kontaminasi silang antara sampel atau kontaminasi sisa produk yang diperkuat. Dalam hal ini, hasil positif palsu dapat terjadi.
Namun, positif palsu dapat dielakkan secara efektif dengan mengontrol proses deteksi secara ketat dan menerapkan strategi berpartisipasi secara acak dalam pendeteksian beberapa sampel negatif.
2. Negatif palsu
Yang perlu dijelaskan di sini adalah bahwa negatif palsu dalam deteksi PCR dan negatif palsu klinis sebenarnya bukan konsep yang sama.
Mengambil diagnosis coronavirus baru, yang dibahas secara intens di Internet, sebagai contoh, negatif palsu klinis mengacu pada kasus di mana gejala klinis dan studi pencitraan sangat dicurigai terinfeksi, tetapi tes PCR berulang kali atau selalu negatif; dan tes PCR negatif palsu mengacu pada sampel yang dikumpulkan Ada cukup banyak virus corona baru dalam sampel tetapi belum terdeteksi.
Untuk menghindari negatif palsu dalam pengujian asam nukleat, kebutuhan utama yang harus diselesaikan adalah: (1) ada cukup virus dalam sel orang yang terinfeksi, (2) sel yang mengandung virus dapat dikumpulkan dalam sampel yang dikumpulkan, dan (3 ) virus dalam sampel terdeteksi Ketiga tautan ini.
Di antara mereka, parameter teknis kit PCR terutama memengaruhi tautan deteksi ketiga.
Hanya untuk link tes ketiga, jika jumlah virus dalam sampel di bawah level tertentu (di bawah batas minimum deteksi), PCR kit tidak akan bisa mendeteksinya. Dari perspektif ini, negatif palsu dalam deteksi PCR tidak dapat sepenuhnya dihindari. Inilah sebabnya mengapa perlu untuk melengkapi pengembangan pengujian antibodi spesifik virus.
