Cara Menghindari Kontaminasi Sel: Tip Pemipetan yang Perlu Anda Ketahui

Di antara banyak variabel yang dikontrol dalam kultur sel, satu variabel tertentu mempengaruhi keseluruhan eksperimen: kontaminasi. Salah satu faktor yang berkontribusi terhadap kontaminasi seluler tidak selalu terlihat, dan meskipun secara diam-diam dapat memengaruhi kesehatan sel dan memengaruhi data pengukuran, itu adalah kontaminasi pemipaan.

Pilihan pipet, ujung pipet, dan program pemipetan mendapat sedikit perhatian saat merancang eksperimen. Bahkan larutan selimut (autoklaf) untuk menghindari kontaminasi pemipaan mungkin tidak seefektif yang diyakini secara umum.

Aturan pertama kultur sel: hindari kontaminasi. Mengapa teknik steril sangat penting untuk keberhasilan kultur sel?

Teknik aseptik adalah satu-satunya cara untuk mendapatkan hasil yang andal dan dapat direproduksi. Polusi dapat memengaruhi pertumbuhan sel, metabolisme, dan kesehatan -- sesuatu yang menarik untuk dipelajari para ilmuwan. Garis sel yang terkontaminasi tidak memiliki sifat yang diinginkan, dan fungsinya berbeda setiap saat, tergantung pada tingkat keparahan kontaminasi. Juga, jika kontaminan melebihi sel yang Anda minati, Anda mungkin akan mempelajari organisme yang salah.

Jenis polutan apa yang sering ditemui para ilmuwan?

Sumber kontaminasi yang umum adalah bakteri, ragi dan jamur. Dalam pekerjaan kultur sel, yang paling sulit dideteksi dan diberantas adalah mikoplasma. Jenis kontaminasi yang kurang umum termasuk, misalnya, leachable plastik dalam bahan habis pakai laboratorium.

Apa penyebab umum kontaminasi sel?

Sumber kontaminasi yang umum adalah pemipetan yang buruk, seperti penggunaan pipet yang terkontaminasi dan ujung non-filter. Selain itu, kurangnya praktik laboratorium yang baik, seperti dekontaminasi instrumen yang tidak memadai seperti inkubator atau lemari aliran laminar, juga menjadi masalah. Untuk menghilangkan mikoplasma, diperlukan penyaringan menggunakan filter 0.1 µm alih-alih filter 0.2 µm.

Tiga kontaminasi pipet:

1. Kontaminasi pipet ke sampel: Ujung pipet atau pipet mencemari sampel.

Cara menghindari:

Gunakan ujung filter steril untuk mencegah kontaminasi pada badan pipet.

Ubah ujung pipet setelah setiap sampel.

Autoklaf atau sterilkan pipet secara teratur dengan etanol. Pilih pipet yang kompatibel dengan autoklaf.

2. Kontaminasi sampel-ke-pipet: Pemipetan sampel ke dalam badan pipet mencemari pipet.

Cara menghindari:

Gunakan ujung filter atau ujung perpindahan positif untuk mencegah sampel masuk ke badan pipet.

Saat memipet, pertahankan pipet dalam posisi vertikal. Simpan pipet dengan tegak.

Miringkan botol saat memipet.

Lepaskan tombol secara perlahan agar sampel tidak terciprat ke dalam pipet. Pilih pipet yang dilengkapi dengan fungsi pelepas lembut.

3. Kontaminasi antar sampel: Sampel pipet sisa dipindahkan ke sampel berikutnya. Biasanya terjadi ketika tip yang sama digunakan berkali-kali.

Cara menghindari:

Ubah ujung pipet setelah setiap sampel.

Gunakan ujung filter atau ujung perpindahan positif untuk mencegah sampel masuk ke badan pipet dan ke sampel berikutnya.

Pastikan ujung pipet tersegel pada pipet untuk menghindari kebocoran sampel. Misalnya tip dari Yongyue Medical.

Apakah ada faktor kontaminasi yang bahkan mungkin tidak disadari oleh para ilmuwan?

Efisiensi autoklaf sering tidak diverifikasi, dan jika autoklaf tidak berfungsi dengan baik, ujung pipet yang diautoklaf mungkin tidak steril. Filter pra-steril yang dibungkus dalam kemasan pelindung adalah pilihan paling aman untuk mencegah kecelakaan tersebut. Proses prasterilisasi untuk ujung pipet berkualitas tinggi divalidasi secara rutin untuk memastikan efisiensi prasterilisasi.

Bagaimana alat pemipetan dan pengeluaran memudahkan para ilmuwan untuk menangani sampel di lingkungan yang steril?

Memilih pipet dan ujung pipet yang tepat dapat mempermudah alur kerja aseptik. Pipet medis Yongyue mudah dibersihkan dan dibuka tanpa alat, mempercepat pembersihan harian. Karena autoklaf lebih efektif dalam menghilangkan kontaminasi daripada tisu etanol, pipet mekanis Sartorius sepenuhnya dapat diautoklaf, yang berarti Anda dapat mendekontaminasi pipet dengan andal. Pengeluaran ujung lunak mencegah potensi risiko kontaminasi dari percikan saat ujung dikeluarkan. Tip filter pra-sterilisasi melindungi sampel Anda dari kontaminasi silang. Tip medis Yongyue juga dikemas dalam kemasan anti bocor, yang berarti bahwa segala kontaminasi dalam kondisi penyimpanan dan pengiriman tidak akan bersentuhan dengan tip atau kotak tip.

Bagaimana para ilmuwan dapat menghindari polusi? Apa tip utama Anda untuk pekerjaan steril?

Pertama, praktik laboratorium yang baik dan perencanaan langkah kerja yang cermat. Pastikan untuk menyimpan hanya apa yang diperlukan untuk alur kerja tertentu dalam kabinet aliran laminar dan gunakan satu biakan sel pada saat yang bersamaan. Plus, pengujian rutin untuk kontaminan seperti mycoplasma memberi Anda ketenangan pikiran dan keyakinan pada hasil Anda. Saat bekerja dalam kondisi steril, uang yang dihabiskan untuk ujung filter yang telah disterilkan dan reagen steril sepadan dengan uang yang dikeluarkan.